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CCK8/細胞增殖檢測

簡要描述:CCK8/細胞增殖檢測在37℃細胞培養(yǎng)箱中孵育一定時間(依不同的細胞種類而定,一般是1 - 4 h)。酶標儀 測定450 nm處的吸光值,以細胞數為橫坐標,吸光值為縱坐標繪制標準曲線。根據此標準曲線可測定未知樣品的細胞數量。使用此 標準曲線的前提是試驗條件與此一致。

  • 更新時間:2025-02-17
  • 訪  問  量:515
  • 價格:面議
  • 廠商性質:生產廠家

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    • CCK8/細胞增殖檢測

    1. 繪制標準曲線

    收集培養(yǎng)可傳代的細胞,確定細胞密度,然后接種細胞;
    按比例(如1:2的比例)依次用培養(yǎng)基等比梯度稀釋細胞,一般做5 - 7個細胞數梯度,每組3 - 6個重復,接種至96孔板中,每孔加入100 ul 的細胞懸液;
    每孔加入10 ul CCK-8 Solution,輕輕混勻,在37℃細胞培養(yǎng)箱中孵育一定時間(依不同的細胞種類而定,一般是1 - 4 h)。酶標儀 測定450 nm處的吸光值,以細胞數為橫坐標,吸光值為縱坐標繪制標準曲線。根據此標準曲線可測定未知樣品的細胞數量。使用此 標準曲線的前提是試驗條件與此一致。
    1. 細胞活性檢測

    接種細胞于96孔板中(100 ul/孔,避免氣泡產生)預培養(yǎng)24 h,同時設置空白組和對照組;
    向每孔加入10 ul CCK-8 Solution(建議沿細胞板壁加入,輕晃,避免氣泡產生);
    在細胞培養(yǎng)箱中孵育一定時間;
    酶標儀測定450 nm處的吸光值。
    1. 細胞增殖—毒性檢測

    接種細胞于96孔板中(100 ul/孔,避免氣泡產生)預培養(yǎng)24 h,同時設置空白組和對照組;
    每孔分別加入不同濃度的待測藥物,在培養(yǎng)箱中孵育一段時間(依據待測藥物而定);
    向每孔加入10 ul CCK-8 Solution(建議沿細胞板壁加入,輕晃,避免氣泡產生),培養(yǎng)箱中孵育一定時間;
    酶標儀測定450 nm處的吸光值。
    1. 換算公式

    細胞存活百分比=[(A-C)/(B-C)] x100
     抑制百分比=[(B-A)/(B-C)] x 100
    A:實驗組吸光值(為含有培養(yǎng)基、細胞、待測藥物和CCK-8 Solution的吸光值)
    B:對照組吸光值(為含有培養(yǎng)基、細胞、CCK-8 Solution的吸光值)
    C:空白組吸光值(為含有培養(yǎng)基、CCK-8 Solution的吸光值)客戶提供
    • 客戶提供

    需要檢測的細胞、需要檢測的藥物
    • CCK8/細胞增殖檢測實驗結果提供

    1. 原始數據、作圖曲線、實驗報告。


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